槟榔黄化病组织RNA提取方法的比较
发布时间：2020-04-15
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周亚奎1,2 杨 云1,2 隋 春3 甘炳春1,2 魏建和3
（1 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所，万宁 571533；2 海南省南药资源保护与开发重点实验室，万宁571533；3 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所，北京 100193）
摘 要：为了从发生黄化病的槟榔茎、叶、花中提取到完整的RNA，采用了CTAB法、Trizol法和异硫氰酸胍法提取槟榔黄化病组织RNA。从RNA的完整性、产率和纯度方面对这几种方法进行了比较，结果表明，异硫氰酸胍法所得RNA完整性较好，条带清晰无明显降解，OD260／OD280介于1.8—2.0之间，RNA得率较高，为120μg/g以上，并能成功进行反转录制备cDNA，表明该RNA可以进行后续分子生物学操作。
关键词：槟榔 黄化病 RNA提取 异硫氰酸胍法
槟榔Areca catechu L．属棕榈科，多年生药用植物，是海南省第二大经济作物。而黄化病是严重危害槟榔生产的一种毁灭性病害，对其发病原因及致病因子至今没有一个明确的结论。传统植物病害检测方法已不能解决这一问题，从基因组RNA人手是可以帮助了解更多关于槟榔黄化病的信息，开启新的思路。
提取高质量的RNA是进行分子生物学研究的基础，关于植物RNA提取的方法很多，常用的有CTAB法、Trizol法、异硫氰酸胍法等，这些方法已经在很多植物上应用并成功提取出RNA，但由于植物化学组份的差异，没有一种特定的方法适合于所有植物的RNA提取。目前还没有关于槟榔组织RNA提取的相关报道，为了得到高质量的RNA对其进行后续研究，本研究分别采用CTAB法、Trizol法、异硫氰酸胍法提取槟榔黄化病组织RNA；对3种方法进行比较，并通过反转录及cDNA的合成对提取的RNA的质量进行检验。 原文详见下方附件：
